正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：Ca++ Mg++-ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
测定原理：根据Ca++ Mg++ -ATP 酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。
需自备的仪器及用品:可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前加入6mL蒸馏水充分混匀待用；用不完的试剂 4℃保存一周；
试剂三：液体 2mL×1 瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存。用时加入3mL蒸馏水， 4℃保存。
试剂五：粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水，溶解后 4℃保存一周。
试剂六：粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水，溶解后 4℃保存一周。
试剂七：液体25mL×1 瓶，室温保存。
试剂八：10mmol/L 标准磷贮备液 10mL×1 瓶，4℃保存。
0.5μmol/mL标准磷应用液配制：将试剂八20倍稀释，即取0.1mL试剂八加1.9mL蒸馏水充分混匀。
定磷剂的配制：按 H2O: 试剂五:试剂六:试剂七=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。 |
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