| 中文名称 | 超氧阴离子(OFR)检测试剂盒 (分光光度法) | |||||||||||||||||||
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| 产品介绍： | 超氧阴离子(OFR)含量检测试剂盒-可见分光光度法 说明书 注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 货号：TOPEK190553 规格：50T/48S 产品内容： 提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 32mL×1 瓶，4℃保存。 试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂三：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂四：氯仿，自备。 亚硝酸钠标准品：液体 1mL×1 支，4℃保存。10µmol/mL 亚硝酸钠。 产品说明： 生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。 ![](\"file:///C:\\Users\\ADMINI~1.BF-\\AppData\\Local\\Temp\\ksohtml13464\\wps1.png\") ![](\"file:///C:\\Users\\ADMINI~1.BF-\\AppData\\Local\\Temp\\ksohtml13464\\wps2.png\") 超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成 NO －，NO2－在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下， 生成红色的偶氮化合物，在 530nm 有特征吸收峰，根据 A530 值可以计算样品中 O －含量。自备实验用品及仪器： 天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、氯仿和蒸馏水。 操作步骤： 一、超氧阴离子提取
2、标准溶液的制备 取适量亚硝酸钠标准液，首先 16 倍稀释至 0.625µmol/mL，然后进行倍比稀释至 0.3125、0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.0049、0.00244、0.0012、0.0006µmol/mL 梯度稀释的标准溶液， 用 0.3125、0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.00244、0.0006µmol/mL 标准管做标准曲线。 3、操作表 ![\"\"](\"http://www.bjbiotopped.com/d/file/Elisa/2023-04-07/89a3d6d7f8be3673b75fd4b9f9992967.png\")
1.标准曲线的绘制 以∆A 标准为 y 轴，标准溶液浓度为 x 轴，绘制标准曲线 y=kx+b。2.超氧阴离子含量的计算 将∆A 样品带入方程得到 x 值（µmol/mL）
超氧阴离子产生速率（µmol/ min/g 鲜重）= 2x×V 样本÷（V 样本÷V 提取×W）÷T=0.1x÷W。
超氧阴离子产生速率（µmol/ min/mg prot）= 2x×V 样本÷（V 样本×Cpr）÷T=0.1x÷Cpr。 (3) 按照血清或培养液体积计算 超氧阴离子含量（µmol/mL）= 2x 超氧阴离子产生速率（µmol/min/mL）= 2x÷T=0.1x。 V 样本：参与反应样本体积，0.2mL；V 提取：提取过程中加入的提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品鲜重，g；T：反应时间，20min。 注意事项： 1、OD 值大于 1.0，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。 2、样品制备好之后，立刻进行测定，请勿将样品进行长时间的低温保存，以免影响测定结果。 3、试剂四有一定的毒性，请操作时做好防护措施。 |
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.
010-5941-2427/2428
189-5515-7225
138-2215-3948
191-3629-5260
182-2235-9015
133-6683-2058
133-6673-1108
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