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PBS DEPC处理水 4%PFA 50×TAE Tris-HCl缓冲液 Gluta固定液
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通用RT-PCR试剂盒(M-mLV)

RM0025T
-20℃
1年
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RM0025T 50T ¥1600.00
RM0025T 25T ¥1200.00
RM0025T 100T ¥2650.00
中文名称 通用RT-PCR试剂盒(M-mLV)
产品介绍：  通用RT-PCR 试剂盒(M-MLV)  
货号：RM0025T
规格：25T/50T/100T
保存：-20℃保存，避免反复冻融，复检期为1 年。
产品组成：
试剂盒组成 25次 50次 100次
M-MLV(200U/μL) 25μL 50μL 50μL ×2
5×M-MLVBuffer 100μL 200μL 400μL
Oligo(dT)16(10uM) 50μL 100μL 200μL
Random 引物(10uM) 50μL 100μL 200μL
RNasin(40U/μL ) 12.5μL 25μL 50μL
dNTPs(10mM) 50μL 100μL 200μL
Taq Polymerase(5U/μL ) 12.5μL 25μL 50μL
10×PCR Buffer 125μL 250μL 500μL
RNase-free ddH2O 500μL 1mL 1mL×2

 产品简介：
本试剂盒适用于各种RNA 制品的反转录反应以及随后的PCR 扩增。它采用M-MLV 进行反转录反应，能够获得较长的反转录产物。同时，在20μL 反转录体系和50μL PCR 反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR 产物用于后续的克隆实验。
本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT 酶采用进口的M-MLV，所以cDNA 更长，基因的信息保留得更完整！
反转录过程中特异的RNase 抑制剂可有效降低由于外源RNase 污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA 克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
操作步骤(仅供参考)：
一、反转录反应
1、在冰浴的无RNase 的离心管中加入如下反应成分：
1-5μg 总RNA 或50-500ng mRNA
2ul Oligo(dT)16 或2ul Random或2 pmole 基因特异性引物
补RNase-free ddH2O 至14.5μL
2、70℃保温5min 后迅速在冰上冷却2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：
4μL     5×M-MLV Buffer
1μL     dNTPs
0.5μL   RNasin
1μL     M-MLV
3、 42℃温浴60min，如果是用随机引物，请先将离心管置25℃温浴10min，再42℃温浴60min。
4、95℃加热5min 终止反应，置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5、用RNase-free ddH2O 将反应体系稀释到50μL，取2-5μL 进行PCR 反应。
二、PCR 反应
1、按以下各组分配制50μL PCR 反应体系：
10×PCR Buffer               5μL
dNTPs                      1μL
上游引物（用户自备10um）  1μL
下游引物（用户自备10um）  1μL
RT 反应产物                2μL
Taq Polymerase              0.5μL
ddH2O                      x μL 
Total Volume                50μL
混匀后短暂离心，PCR 仪扩增，琼脂糖凝胶电泳观察结果。
注意事项：
1、用于cDNA 合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC 进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。
2、试剂盒的各组分应在-20℃保存，避免反复冻融，有效期12个月。
3、RNA 样品要避免反复多次冻融，应使RNA在冰浴中处于融化状态。
 
 

注意：

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 

备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.

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