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PBS DEPC处理水 4%PFA 50×TAE Tris-HCl缓冲液 Gluta固定液
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精子细胞BWW培养基

CM0052D
-20℃
1年
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CM0052D 100ml ¥550.00
CM0052D 500ml ¥1340.00
中文名称 精子细胞BWW培养基
产品介绍： 精子细胞BWW培养基

产品简介：
       正常精液是一种混合物，在射精时由睾丸和附睾的分泌物及悬浮其中的精子与前列腺、
精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成，最终射出的混合物是一种粘稠的液体。精子分析的方
法有很多，其中可通过培养进行检测。
       精子细胞 BWW 培养基又称为获能培养液（capacitatingmedium），主要由
系列盐离子、酚红、葡萄糖、丙酮酸钠、BSA 等以及抗生素组成，每 1000ml BWW 培养
基中含 100,000U 青霉素钠盐和 100mg 链霉素，是一种旨在用于广谱动物和人体精子细
胞获能处理的常用营养液。其标准化成分配方依据 Biggers-Whitten-Whittingham(BWW)
研究小组在 1971 年发表的成果，适合于各种动物和人体精子细胞处理，该试剂经无菌处理。

产品组成：
精子细胞BWW培养基      100ml / 500ml    -20℃

自备材料：
1、 无菌离心管
2、 离心机
3、 细胞培养箱

操作步骤 (仅供参考) ：
1、取干净的精液样本室温放置 30-60min，使之充分液化。
2、制备精子细胞(仅供参考，不是必须步骤)：
1)、上泳法：取一个无菌的 15ml 锥底离心管，加入 1ml 液化的精液，在其上方轻轻加入
Earle 培养液 1.2ml，45°倾斜试管，37℃孵育 1h。轻轻竖立试管，取出最上层的 1ml 液体。
加入 8ml 增补的 Earle 培养液稀释，500g 离心 5min，弃上清。加入 Earle 培养液 0.5ml
重新悬浮细胞，用于精子密度或功能的评估。
2)、非连续密度梯度法：取一个无菌的 15ml 锥底离心管，加入 3ml 80%的 Percoll。轻轻
加入 3ml 40%的 Percoll 于 80%的 Percoll 液面上，小心操作，不要打乱两种液体的界面。
轻轻加入 1-2ml 精液于梯度溶液上，500g 离心 20min，弃上清。将管底的精子团重新悬
浮于 5-10ml 的 Earle 培养液中，500g 离心 5min，弃上清。加入 1mlEarle 培养液，重新
悬浮。
3、将含有精子细胞的离心管置于 37℃含 5%CO 2 、95%空气的细胞培养箱中孵育 1h。如
无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于 37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，
大多数活动的精子从精浆中游离到覆盖上面的培养液内。
4、500g 离心精子悬液 5min，使精子细胞密度接近于 10×10 6 /ml，将精子重悬于 0.5-1ml
精子细胞BWW培养基中，并在37℃含5%CO 2 、95%空气的细胞培养箱内孵育18-24h。
如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于 37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程
中，将试管 20°倾斜。

注意事项：
1、 注意无菌操作，尽量避免污染。
2、 如无 Earle 培养液和增补的 Earle 培养液，可用精子细胞 BWW 培养基代替。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

注意：

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 

备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.

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